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凋亡诱导剂Epibrassinolide表油菜素内酯

  表油菜素内酯Epibrassinolide (24-Epibrassinolide) 是一种广泛存在的植物生长激素,具有缓解植物重金属和农药胁迫潜力。表油菜素内酯Epibrassinolide (24-Epibrassinolide) 在各种癌细胞中是一种潜在的凋亡诱导剂,而不影响非肿瘤细胞生长。
 
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  生物活性
 
  体外研究
 
  表油菜素内酯Epibrassinolide (EBR) 是油菜素类固醇类植物生长调节剂家族的一种生物活性化合物。将细胞与不同剂量 (0-100 μM) 的 表油菜素内酯Epibrassinolide 孵育 24 或 48 小时,并通过 MTT 测定法测定细胞活力。与 LNCaP 和 DU145 前列腺癌细胞中未处理的样本相比,表 Epibrassinolide表油菜素内酯 以剂量和时间依赖性方式诱导细胞活力丧失。增加浓度的 Epibrassinolide 比 DU145 细胞对 LNCaP 细胞活力损失更有效,这表明雄激素依赖性细胞比雄激素非依赖性前列腺癌细胞对 Epibrassinolide 表油菜素内酯更敏感。在进一步的实验中,选择了 25 μM Epibrassinolide,因为它对两种细胞系都有中等的细胞毒性作用。通过计算 96 小时内的细胞数来检查表 Epibrassinolide表油菜素内酯 处理对细胞增殖的影响。在 LNCaP 中观察到比 DU145 细胞更高和更早的细胞增殖抑制[1]。
 
  实验参考方法
 
  细胞测定[1]
 
  实验概述
 
    细胞系:
 
      人前列腺癌细胞系 LNCaP (CRL-1740) 和 DU145 (CRL-2698)。
 
      正常前列腺上皮细胞系 PNT1a。  相关产品推荐:CCCP氧化磷酸化解偶联剂
 
  培养条件
 
    培养基:使用 RPMI 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清、10,000 U 青霉素/mL 和 10 mg 链霉素/mL。
 
    培养条件:在 37°C、湿度为 5% CO2 的孵育箱中(HERA cell 150)培养。
 
  实验步骤
 
    1、将细胞在 96 孔板中以 1×10^4 密度接种,并在过夜后进行处理。
 
    2、用不同浓度的 表油菜素内酯Epibrassinolide 处理细胞,处理时间为 24 小时和 48 小时。
 
    3、向每孔添加 10 μL MTT 染料(5 mg/mL),并在 37°C 下孵育 4 小时。
 
    4、将形成的福尔马赞晶体溶解于 200 μL DMSO 中。
 
    5、用分光光度计在 570 nm 处读取溶解福尔马赞的密度。
 
  备注:MCE 并未独立确认这些方法的准确性。仅供参考。
 
  参考文献
 
  [1]. Shahzad B, et al. Role of 24-epibrassinolide (EBL) in mediating heavy metal and pesticide induced oxidative stress in plants: A review. Ecotoxicol Environ Saf. 2018 Jan;147:935-944.
 
  [2]. Obakan P, et al. Activation of polyamine catabolic enzymes involved in diverse responses against epibrassinolide-induced apoptosis in LNCaP and DU145 prostate cancer cell lines.Amino Acids. 2014 Mar;46(3):553-64.

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