人参皂苷 Rb1

　　Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 是中药人参的成分。Ginsenoside 抑制 Na+, K+-ATPase 活性，IC50 为 6.3±1.0 μM。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 也抑制 IRAK-1 激活及 NF-κB p65 的磷酸化。

 

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　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　大鼠脑微粒体 Na+，K+-ATPase 活性被 Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 显著且迅速地抑制。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 对 Na+，K+-ATPase 的 IC50 为 6.3±1.0 μM。随着人参皂苷 Rb1 浓度的增加或 Na+ 和 K+ 浓度的降低，抑制作用增强。

 

　　动力学分析表明，人参皂苷是一种非竞争性 ATP 抑制剂[1]。人参皂苷 Rb1 显著抑制白细胞介素 1 受体相关激酶 1 (IRAK-1)、IKK-β、NF-κB 和 MAP 激酶 (ERK、JNK 和 p-38) 的激活；然而，LPS 与 Toll 样受体 4 之间的相互作用、IRAK-4 激活和 IRAK-2 激活不受影响[2]。

 

　　Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 是中药 Panax ginseng 的成分。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 是调节孕烷 X 受体 (PXR)/NF-κB 信号传导的主要生物活性化合物。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 是人参皂苷提取物 (GSE) 中具有强效抗炎活性的化合物。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 (10 μM) 的浓度根据初步研究进行了优化，以确保足够的抗炎活性并且没有明显的细胞毒性。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 显著降低 TNF-α 诱导的 IL-1β 和 iNOS mRNA 水平上调，并恢复 LS174T 细胞中 PXR 和 CYP3A4 的 mRNA 水平。TNF-α 导致 PXR 蛋白水平显著降低和磷酸化与总 NF-κB p65 的比例增加，这两者都被 Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 显著消除[3]。

 

　　体内研究

 

　　30 mg/kg 和 60 mg/kg 两种剂量的 Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 显著减轻组织学肺损伤。30 mg/kg 和 60 mg/kg 剂量的 Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 均可显著减轻组织学肠损伤[4]。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 (Rb1) 是中药 Panax ginseng 的一种成分，对脂多糖 (LPS) 诱导的肠系膜微血管高通透性及其潜在机制具有有益作用。在一些大鼠中，Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 (每小时 5 mg/kg) 在 LPS 输注后 30 分钟通过左颈静脉给药。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 减少微血管内皮细胞中的小窝数量。Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 改善内毒素血症发作后的微血管通透性过高，并通过抑制小窝形成和连接破坏来改善肠水肿，这与抑制 NF-κB 和 Src 激活有关[5]。

 

　　实验参考方法

 

　　细胞实验[3]

 

　　将LS174T细胞接种于细胞成像培养皿中，过夜培养后，分别用GSE（100 μg/mL）、人参皂苷Rb1（10 μM）或CK（10 μM）处理3小时，随后加入或不加入TNF-α（20 ng/mL）继续孵育6小时。孵育结束后，收集细胞并用4%多聚甲醛溶液在20°C下固定20分钟。PBS洗涤后，使用含0.2% Triton X-100的PBS在室温下透化5分钟。接着在含0.1% Triton X-100和5%牛血清白蛋白（BSA）的封闭缓冲液中封闭，再于4°C下与兔抗NF-κB p65一抗孵育过夜。次日，在含1% BSA的PBS中与Alexa Fluor 488标记的山羊抗兔IgG二抗室温避光孵育30分钟。最后使用蔡司710共聚焦显微镜拍摄荧光图像。

 

　　MCE未独立验证上述方法的准确性，仅供参考。

 

　　动物给药

 

　　小鼠实验 [4]

 

　　选用9–12周龄、体重17–22 g的雄性C57BL/6小鼠，随机分为8组（每组n=8）：

 

　　(1) 假手术组（Sham）：仅行肠系膜上动脉（SMA）游离但不阻断；

 

　　(2) 缺血/再灌注模型组（II/R）：建立肠道缺血/再灌注（II/R）损伤模型，不予治疗；

 

　　(3) II/R + NS组：II/R模型基础上，再灌注前10分钟腹腔注射生理盐水；

 

　　(4) 和 (5) 分别为II/R+Rb1-30组和II/R+Rb1-60组：在II/R模型基础上，再灌注前10分钟分别腹腔注射30 mg/kg或60 mg/kg的人参皂苷Rb1；

 

　　(6) ATRA+Sham组：假手术组同时给予ATRA（Nrf2/ARE信号通路抑制剂）；

 

　　(7) ATRA+II/R组：II/R模型联合ATRA治疗；

 

　　(8) ATRA+II/R+Rb1-60组：II/R模型联合ATRA及60 mg/kg Rb1治疗。

 

　　第6、7、8组小鼠在术前两周每日腹腔注射ATRA（10 mg/kg），并饲喂维生素A缺乏饮食；其余组小鼠则给予等体积玉米油，并饲喂正常对照饮食。

 

　　大鼠实验 [5]

 

　　选用体重200–250 g的雄性Wistar大鼠，随机分为四组，每组26只。使用尿烷（urethane，2 g/kg，肌内注射）麻醉后，进行左侧股静脉和左颈静脉插管。

 

　　LPS组：通过左侧股静脉输注LPS生理盐水溶液（5 mg/kg/小时），持续90分钟；

 

　　假手术组（Sham）和单独Rb1组（Rb1）：输注等量溶剂（生理盐水）替代LPS；

 

　　Rb1后处理组（LPS+Rb1）：在LPS给药30分钟后，通过左颈静脉持续输注人参皂苷Rb1（5 mg/kg）；

 

　　单独Rb1组和Sham组：分别输注Rb1溶液或等体积生理盐水，不给予后续LPS处理。

 

　　另设一组实验，采用2%戊巴比妥钠（60 mg/kg，腹腔注射）麻醉，分别给予生理盐水、LPS或人参皂苷Rb1。麻醉恢复后，动物可自由饮水和进食，记录其在LPS刺激后4天内的存活率。

 

　　MCE未独立验证上述方法的准确性，仅供参考。

 

　　参考文献

 

　　[2]. Zhang J, et al. Ginsenosides Regulate PXR/NF-κB Signaling and Attenuate Dextran Sulfate Sodium-Induced Colitis. Drug Metab Dispos. 2015 Aug;43(8):1181-9.

 

　　[3]. Joh EH, et al. Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 and its metabolite compound K inhibit IRAK-1 activation--the key step of inflammation. Biochem Pharmacol. 2011 Aug 1;82(3):278-86.

 

　　[4]. Jiang Y, et al. Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 Treatment Attenuates Pulmonary Inflammatory Cytokine Release and Tissue Injury following Intestinal Ischemia Reperfusion Injury in Mice. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:843721.

 

　　[5]. Zhang Y, et al. Ginsenoside Rb1人参皂苷 Rb1 ameliorates lipopolysaccharide-induced albumin leakage from rat mesenteric venules by intervening in both trans- and paracellular pathway. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2014 Feb 15;306(4):G289-300.