Hyaluronidase, Bovine testes是一种内糖苷酶
2025-07-25 
MCE
Hyaluronidase, Bovine testes (Hyaluronate 4-glycanohydrolase; Hyaluronoglucosaminidase) 是一种内糖苷酶 (endoglycosidase)，通过裂解糖苷键来解聚 Hyaluronic acid (HA) (HY-B0633A)。Hyaluronidase 降解 HA 并激活膜受体，触发 NF-κB 激活的途径。Hyaluronidase 用于研究与 HA 填充剂注射相关的肉芽肿性异物反应、血管受损所致软组织坏死及简单结节、矫治过度、结节发炎或组织缺血。
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CAS No. : 37326-33-3
别名：玻璃酸酶; 透明质酸酶；Hyaluronate 4-glycanohydrolase, Bovine testes; Hyaluronoglucosaminidase, Bovine testes
体外研究：
1. Hyaluronidase 抑制试验[3]
(1) 将 10 μL 8 mg/mL Hyaluronidase 在缓冲溶液 (0.1 M 乙酸盐缓冲液, pH 3.6) 中与样品混合加入试管，并在 37 °C 下孵育 20 分钟。
(2) 将 20 μL 12.5 mM 氯化钙加入混合物中，并在 37 °C 下再孵育 20 分钟。
(3) 用缓冲液中的 50 μL 2.4 μg/mL 透明质酸处理活化的 Ca2+ 混合物，并在 37 °C 下进一步孵育 40 分钟。
(4) 加入 2 μL 0.4 N 氢氧化钠和 20 μL 0.4 N 四硼酸钾四水合物，然后在 100 °C 下水浴孵育 3 分钟。
(5) 冷却至室温后，向混合物中加入 600 μL DMAB 溶液，并在 37 °C 下孵育 20 分钟。
(6) 使用酶标仪在 585 nm 处测量吸光度。
体内研究：
1. Hyaluronidase 对 HA 诱导的血管并发症中皮肤坏死的影响[7]
(1) 使用 10 只体重 3-4 kg 的兔子，通过肌肉注射 ketamine (50 mg/kg) 和 xylazine (10 mg/kg) 对兔子进行麻醉。
(2) 剃去耳朵上的毛发，通过电凝术凝固耳后的血管后支。用 1% lidocaine (HY-B0185) 浸润耳朵近端皮肤，并切开皮肤以暴露后耳动脉的前支。
(3) 在手术显微镜下用 30 号针头穿刺动脉，并注射 0.25 mL HA 填充剂。最初注入动脉的少量 HA 填充剂可以扩张动脉腔，有助于针头在动脉内的定位。
(4) 将 HA 填充剂注射到双耳，其中一只耳朵皮下注射 750 IU Hyaluronidase。5 只兔子 (4 h 干预组) 在 HA 注射后 4 h 注射Hyaluronidase，另外 5 只兔子 (24 h 干预组) 在 HA 注射 24 h 后注射 Hyaluronidase。
(5) 拍摄皮肤变化的进展情况，并测量最终坏死区域。使用 Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 软件进行统计分析。
2. Hyaluronidase 对基于纳米颗粒的抗肿瘤活性的影响[8]
(1) 本实验采用雌性 Balb/c 小鼠。将 4T1 细胞悬浮于 PBS 中，密度为 1×106/50 μL，分别注射于小鼠单侧或双侧后部皮下。
(2) 当肿瘤体积达到 110-150 mm3 时进行体内实验。将小鼠随机分为 4 组 (n=5)：生理盐水注射组、Hyaluronidase 注射组、NM-Ce6 诱导 PDT 组、Hyaluronidase + NM-Ce6 诱导 PDT 组。Hyaluronidase 注射组：将 1500 U Hyaluronidase 溶于 50 µL PBS 中，注射至每个肿瘤内。注射 Hyaluronidase 1 小时后，每只小鼠静脉注射 200 µL NM-Ce6，Ce6 浓度为 1 mg/mL (Ce6 剂量=10 mg/kg)。注射 NM-Ce6 24 小时后，以 2 mW/cm2 的功率密度，将肿瘤暴露于 660 nm 光中 60 分钟，进行 PDT。
(3) 在初次治疗后的第 6 天再次重复相同的程序。记录肿瘤体积和小鼠体重，持续 12 天。治疗后，取出每组 4 个肿瘤并称重，取出每组的主要器官进行 H&E 染色。
参考文献
[1]. Vartanian AJ, et al. Injected hyaluronidase reduces restylane-mediated cutaneous augmentation. Arch Facial Plast Surg. 2005 Jul-Aug;7(4):231-7.
[2]. Brandon E, et al. The Use of Hyaluronidase in Cosmetic Dermatology: A Review of the Literature. J Clin Investigat Dermatol. 2015;3(2): 7.
[3]. Apaza Ticona L, et al. Rubus urticifolius Compounds with Antioxidant Activity, and Inhibition Potential against Tyrosinase, Melanin, Hyaluronidase, Elastase, and Collagenase[J]. Pharmaceuticals (Basel). 2024 Jul 13;17(7):937.
[4]. Jung H. Hyaluronidase: An overview of its properties, applications, and side effects[J]. Arch Plast Surg. 2020 Jul;47(4):297-300.
[5]. Lee W, et al. Comparative Effectiveness of Different Interventions of Perivascular Hyaluronidase[J]. Plast Reconstr Surg. 2020 Apr;145(4):957-964.
[6]. Wang M, et al. Comparison of Intra-arterial and Subcutaneous Testicular Hyaluronidase Injection Treatments and the Vascular Complications of Hyaluronic Acid Filler[J]. Dermatol Surg. 2017 Feb;43(2):246-254.
[7]. Kim DW, et al. Vascular complications of hyaluronic acid fillers and the role of hyaluronidase in management. J Plast Reconstr Aesthet Surg. 2011 Dec;64(12):1590-5.
[8]. Gong H, et al. Hyaluronidase To Enhance Nanoparticle-Based Photodynamic Tumor Therapy. Nano Lett. 2016 Apr 13;16(4):2512-21.
