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D-Luciferin

  D-luciferin 是荧光素酶的天然底物,可催化生物发光昆虫产生典型的黄绿光。

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  D-Luciferin的生物活性

  体外

  D-荧光素是酶荧光素酶(Luc)的天然底物,其催化萤火虫的典型黄绿色光的产生。本综述涵盖D-荧光素的合成以及作为荧光素酶的底物或抑制剂的衍生物或类似物。 美国萤火虫Photinus pyralis,这种酶在体外和光学成像技术中更常用。

  体内

  使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前使用最广泛的技术。 将总信号强度相对于D-荧光素注射后的时间作图,以产生时间 - 强度曲线。 除了峰值信号之外,在D-荧光素注射后的固定时间点(5,10,15和20分钟)的信号被确定为峰值信号的替代。 给定时间 - 强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示D-荧光素注射后的时间变化模式。

  D-Luciferin的实验参考方法

  Animal Administration

  小鼠

  在接种HCT116-Luc细胞后3,5,7,10,12,14,19,21,24和28天使用冷却的电荷耦合装置相机系统(IVIS成像系统100)进行体内BLI。 小鼠在肩胛骨附近皮下注射100μL磷酸盐缓冲盐水中的75mg / kg D-荧光素,并在异氟烷麻醉下置于成像系统的不透光室中。 在注射后5分钟开始,以每分钟一个图像的速率依次获得曝光时间为1秒的背部发光图像,直到D-荧光素注射后20分钟。 由于光发射的延长时间过程,数据采集在第3天或第5天持续到注射后40分钟并且在第7天持续到25分钟。 分档为4,视场为15厘米。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

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