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O-Propargyl-Puromycin

    O-Propargyl-Puromycin 是嘌呤霉素的炔类似物; 是蛋白质合成的高效抑制剂。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    O-炔丙基嘌呤霉素可用于成像和亲和纯化细胞和动物体内的新生蛋白质。O-炔丙基嘌呤霉素在网织细胞裂解物中和培养的细胞中均抑制蛋白质的合成,其效力比未修饰的嘌呤霉素低2至3倍。O-炔丙基嘌呤霉素与新生的多肽链形成共价结合物,该结合物被蛋白酶体迅速翻转,并可以通过铜(I)催化的叠氮化物-炔烃环加成反应看到或捕获。
 
    体内
 
    未注射小鼠的组织显示出较低的非特异性染色,而注射O-炔丙基-嘌呤霉素的小鼠的组织显示出掺入新生蛋白质的O-炔丙基-嘌呤霉素的特定模式。在小肠中,隐窝和小肠绒毛底部的细胞翻译最强,这与这些细胞的高增殖和分泌活性一致。Paneth细胞中的污渍特别强,位于靠近隐窝底部并充满分泌性囊泡的Paneth细胞中。Paneth细胞中囊泡的强烈O-炔丙基-嘌呤霉素标记表明,过早终止的O-炔丙基-嘌呤霉素缀合的分泌蛋白易位到内质网(ER)内腔[1
 
    实验参考方法
 
    动物管理局
 
    小鼠:将100μL的O-炔丙基-嘌呤霉素在PBS中的20mM溶液腹膜内注射到3周龄的小鼠中,并且将注射有100μL的PBS的小鼠用作阴性对照。1小时后收获各种器官,并在福尔马林中固定过夜。将器官碎片包埋在石蜡中,切成薄片,然后用二甲苯染色以除去石蜡。用乙醇染色并在TBS中补液后,将组织切片用20μM四甲基罗丹明(TMR)-叠氮化物染色。组织切片用Hoechst复染,安装在标准安装介质中,然后通过荧光显微镜和DIC成像。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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