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AICAR是AMPK激活剂

    AICAR是一种可渗透细胞的AMP活化蛋白激酶 (AMPK) 激活剂。
 
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    体外
 
    HepG2细胞分别用各种浓度的AICAR(0.1-1.0 mM)处理12、24和48 h。当AICAR在0.25、0.5和1.0 mM时,IR-β的表达水平在48 h时显着降低,分别为对照的50%,53%和46%。
 
    体内
 
    向14周大的雄性瘦型(L; 31.3 g体重)野生型andob / ob(O; 59.6 g体重)小鼠注射0.5 mg AMP激活的激酶(AMPK)激活剂AICAR(A) / g /天或生理盐水对照(C),持续14天。最后一次注射后24小时(包括禁食12小时),杀死所有小鼠,并切除足底屈肌复合肌(腓肠肌,比目鱼肌和plant肌)进行分析。OC(159±12 mg)小鼠的肌肉质量低于LC,LA和OA(分别为176±10、178±9和166±16 mg)小鼠,与体重变化无关。与运动组和AICAR组(0.5 mg / g体重)相比,未治疗组的肾脏重量明显更高。运动组的心脏重量高于其他组,而AICAR治疗组的肝脏重量显着高于运动组和未治疗组。
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    将HepG2细胞(5×10 5个细胞)铺在6孔培养皿中,然后在转染前在无血清培养基中孵育12小时。用FuGENE6 Transfection Reagent转染一微克质粒。转染5小时后,除去培养基,然后将补充有或没有AICAR(0.1-1.0mM)的培养基加入到每个孔中。刺激介质每24小时更换一次。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    Animal Administration
 
    小鼠
 
    十四周大的瘦肉(Lep ob / +或Lep ob / +)和ob / ob(Lep ob / Lep ob)雄性小鼠。经过14天的实验处理(在AICAR注射后24小时,包括12小时禁食)后,从麻醉的小鼠呼吸4%异氟烷中干净地切除(从肌腱到肌腱)the屈复合肌。快速称重肌肉,然后进行组织学处理或在液氮中冷冻并储存在-80°C下。麻醉的小鼠通过横diaphragm膜横断并去除整个心脏而被杀死,这是在通过呼吸将4%的异氟烷??通过针刺直接采血后进行的。将AICAR或盐水(对照)皮下注射到背部的外侧远端部分。AICAR每天一次,每次0.5 mg / g,连续14天。以与AICAR治疗相同的方式以与AICAR治疗相同的体积注射盐水(对照)。
 
    大鼠
 
    对5周大的ZDF雄性大鼠皮下注射单剂量的AICAR(0.5 mg / g体重),或在跑步机上进行单轮跑步(60分钟,速度为25 m / min)。 5%倾斜)。未经处理的ZDF大鼠用作对照组(每组n = 5)。皮下注射AICAR后一小时或跑步机跑步后一小时,大鼠因颈脱位而处死。为避免肌肉痉挛和缺氧的任何影响,数秒内将红色和白色腓肠肌去除,并立即冷冻钳紧,以便以后确定AMPK活性。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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